Test ELISA recombinante: Chagatest

Método de 3a generación para la detección de anticuerpos contra el Trypanosoma cruzi

 

SIGNIFICACION CLINICA

La enfermedad de Chagas es una infección parasitaria pro- ducida por el Trypanosoma cruzi. El diagnóstico de labora- torio depende del estadio en el cual se encuentre la enfer- medad. Durante la fase aguda, se efectúa directamente mediante la comprobación de los parásitos en sangre o por métodos inmunológicos que detecten IgM. Durante la fase crónica, se pueden usar métodos inmunológicos como: reacción de fijación de complemento, aglutinación de látex, floculación, hemaglutinación, aglutinación directa, inmunofluorescencia o ELISA.

FUNDAMENTOS DEL METODO

En esta técnica cualitativa para la detección de anticuerpos anti-T. cruzi, la muestra se diluye en el soporte en el que se encuentran inmovilizados antígenos recombinantes (1, 2, 13, 30, 36 y SAPA), obteniéndose un método de 3a generación. Estos antígenos se obtienen por técnica de ADN recombinante a partir de proteínas específicas de los estadios epimastigote y tripomastigote del T. cruzi, correspondientes a zonas alta- mente conservadas entre distintas cepas. La tecnología em- pleada permite asegurar una mezcla antigénica de composi- ción conocida y constante lote a lote, brindando resultados reproducibles, específicos y con una elevada sensibilidad. Si la muestra contiene los anticuerpos específicos, éstos for- marán un complejo con los antígenos y permanecerán uni- dos al soporte. La fracción no unida se elimina por lavado tras lo que se agregan anticuerpos anti-inmunoglobulina humana conjugados con peroxidasa. Si se produjo la reac- ción en la primera etapa del proceso, se unirá el conjuga- do. Luego de un nuevo lavado se agrega el sustrato enzi- mático. En los casos en que se haya unido el conjugado habrá aparición de color celeste. La reacción se detiene con ácido sulfúrico, con lo que el color celeste vira al ama- rillo.

 

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